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人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit試劑盒
人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit試劑盒
品牌:CK-E10504
貨號(hào):CK-E10504
規(guī)格:48T/96T
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人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit試劑盒

人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA Kit試劑盒

詳細(xì)信息

貨號(hào):CK-E10504

品牌: 原鑫生物

供應(yīng)商:上海原鑫生物科技有限公司

檢測(cè)限: /

檢測(cè)方法: 酶聯(lián)免疫法雙抗夾心法

應(yīng)用: ELISA

適應(yīng)物種: 人/動(dòng)物/植物

樣本: 血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織液等

規(guī)格: 96T/48T

人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒操作說明 操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。


人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒操作說明 檢測(cè)試劑注意事項(xiàng):

1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。

2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,

3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。

4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘

5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。

6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。

7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。

8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見盒內(nèi)標(biāo)示。


人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒操作說明 操作步驟:

1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。

2. 取出酶標(biāo)板,按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。

3. 空白微孔中加入50μl的樣品,空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水;

4. 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對(duì)照孔,切忌:生物素只加樣品孔!)

5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液;(不含空白對(duì)照孔)

6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后,37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí);(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)

7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋)

8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙徹底拍干;

9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對(duì)照孔)

10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘;

11.各孔加入50μl終止液,終止反應(yīng);


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